STR鉴定描述:
利用荧光(guang)标记(ji)扩增产(chan)(chan)物(wu)长度多(duo)态(tai)分(fen)析方法对细胞样本进行(xing)9个/16个STR位(wei)点(dian)进行(xing)分(fen)型。设计(ji)了PCR引物(wu),组成2个PANEL用于扩增多(duo)态(tai)位(wei)点(dian)。位(wei)点(dian)的(de)荧光(guang)标记(ji)采用引物(wu)上标记(ji)5’FAM荧光(guang)标记(ji)。引物(wu)用在线(xian)Primer3 软(ruan)件设计(ji)(//frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/primer3_www.cgi)。PCR产(chan)(chan)物(wu)稀释后取(qu)少量与内(nei)标标记(ji)混匀后直接(jie)上ABI 3130xl进行(xing)毛细管电泳,数据文(wen)件用GeneMapper4.0(Appliedbiosystems)来分(fen)析。
STR(Short Tandem Repeat,短串(chuan)联重复序列(lie)(lie))是一类广泛存在于真核生物基因组中(zhong)的DNA串(chuan)联重复序列(lie)(lie),由于其核心(xin)序列(lie)(lie)重复次数存在个体差异多(duo)态(tai)性,因此(ci)STR也被称为细(xi)(xi)胞(bao)(bao)的DNA指纹。2011年美(mei)国颁布了细(xi)(xi)胞(bao)(bao)STR鉴定国家标(biao)准(zhun)(ANSI/ATCC ASN-0002-2011)。目前STR检测已被广泛应用于亲子鉴定、个体识别、细(xi)(xi)胞(bao)(bao)来源判定等(deng)(deng)方面。ATCC、DSMZ、JCRB等(deng)(deng)国际(ji)知名细(xi)(xi)胞(bao)(bao)库已将STR基因分(fen)型列(lie)(lie)为细(xi)(xi)胞(bao)(bao)鉴定的金标(biao)准(zhun)。
细胞送样要求:
将1×10的五次方以上细(xi)胞(bao)悬液置于1.5毫升(sheng)EP管(guan),用(yong)封口膜密(mi)封,管(guan)壁标记清(qing)楚细(xi)胞(bao)的名称(cheng)(如HepG2),数量较多时可用(yong)编号(hao),并附送检清(qing)单。
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