Suspension™ 293 （XF）悬浮培养基由100多种小分子化合物组成的无血清无动物组分的培养基，适用于细胞的293系列悬浮培养和大规模的反应器培养，培养基不含有蛋白，添加少量激素可维持细胞内正常蛋(dan)白表达含量，组分稳(wen)定，批次(ci)无(wu)差异。

培养(yang)基组成：500ml Suspension™ 293 （XF）悬浮培养基(启达生物：SP03)，5ml G/A(启(qi)达生物 :SD0038）

操作(zuo)步骤：

细(xi)胞从常规培养基到无血清培养基的适应性训练方法根据细(xi)胞的类型分(fen)为2种:

对于悬浮细胞（需要2-6周）：

1. 当细胞密度达(da)到(dao)最大时开始适应性训练；

2. 加入(ru)无(wu)血清培养(yang)基，使无(wu)血清培养(yang)基和正常培养(yang)基的比例变(bian)为原来(lai)的1/2

3. 当细胞(bao)(bao)密(mi)度(du)达(da)到(dao)最大时，加入无血清培养基，使细胞(bao)(bao)密(mi)度(du)成为原(yuan)来的1/5；

4. 培(pei)养细(xi)胞，如果细(xi)胞达(da)到最(zui)大密度时，细(xi)胞的(de)存活(huo)率大于85％，并且达(da)到最(zui)大密度的(de)时间与之前

相(xiang)近，那么细(xi)(xi)胞可以继续进行适应性训练；如果(guo)细(xi)(xi)胞显示生长缓(huan)慢或者存活率降低，那么需要重复(fu)2-3

步鄹3次；

5. 可逐步(bu)提高无血(xue)清培养(yang)基的比例，直(zhi)至细胞(bao)可以(yi)完全(quan)在(zai)无血(xue)清培养(yang)基中(zhong)生长。

对于贴壁细胞（需要2-6周）：

1. 细胞达到最(zui)大密(mi)度(du)时，开始适应(ying)性训练；

2. 胰酶消化贴(tie)壁细胞，350×g离心5min收集(ji)细胞，用含5％血清的无血清培养基重悬，使(shi)细胞密度达

到(dao)4×10^5cells/ml。

3. 培养细胞至(zhi)达(da)到最大密度；

4. 重复2 - 3步骤，依次(ci)在无(wu)血(xue)清培养(yang)基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血(xue)清，进行细胞培养(yang)；如果(guo)

细胞的(de)存活率低(di)于80％，那么需(xu)要恢复至前(qian)一个(ge)血清(qing)的(de)含量，或(huo)者(zhe)采用更加细化的(de)递减含量。

5. 直(zhi)到完(wan)全(quan)使用无血清培养基培养细(xi)胞。

声明：产品仅供科研使用