Suspension™ CHO (XF) 细胞悬浮(fu)培养基是(shi)一种化学限定(ding)、无(wu)(wu)动物成分(fen)(fen)的(de)培养基，为中(zhong)国仓鼠卵巢(chao) (CHO) 细胞的(de)长期生长而开发。培养基中(zhong)无(wu)(wu)大分(fen)(fen)子(zi)，可实(shi)现细胞分(fen)(fen)泌蛋白的(de)分(fen)(fen)离和纯化，培养基采(cai)用丙谷酰胺代替L-谷氨酰胺，减(jian)少(shao)胺积累，与含(han)有10%血清的(de)正常培养基生长周期保持一致。

培养基组成：500ml Suspension™ CHO (XF) 细胞悬浮培养基(启达生(sheng)物：SP04)，5ml G/A(启达生物 :SD0038）

操作步骤：

细胞从(cong)常(chang)规培(pei)养基(ji)(ji)到无血清培(pei)养基(ji)(ji)的适应性训(xun)练方(fang)法(fa)根(gen)据细胞的类型分为(wei)2种:

对于悬浮细胞（需要2-6周）：

1. 当(dang)细(xi)胞密度(du)达到最(zui)大时(shi)开始(shi)适应性训练；

2. 加入无(wu)血清(qing)培(pei)养(yang)基，使(shi)无(wu)血清(qing)培(pei)养(yang)基和(he)正常培(pei)养(yang)基的比例变为原来的1/2

3. 当(dang)细(xi)胞密(mi)度达到(dao)最(zui)大时，加入(ru)无血清(qing)培养基，使细(xi)胞密(mi)度成为原(yuan)来的1/5；

4. 培养细(xi)胞，如(ru)果细(xi)胞达(da)到最(zui)大密度时，细(xi)胞的(de)(de)存活(huo)率大于85％，并且达(da)到最(zui)大密度的(de)(de)时间与之前

相近，那(nei)(nei)么(me)细(xi)胞可(ke)以继(ji)续进(jin)行适应性训练；如果细(xi)胞显示生长(zhang)缓慢或者存活率降(jiang)低，那(nei)(nei)么(me)需要重复2-3步鄹3次；

5. 可(ke)逐(zhu)步(bu)提高(gao)无血清(qing)培(pei)养基的比例，直至(zhi)细胞可(ke)以完全在无血清(qing)培(pei)养基中(zhong)生长(zhang)。

对于贴壁细胞（需要2-6周）：

1. 细胞达(da)到最大密度时(shi)，开始适应性训练；

2. 胰酶消化贴(tie)壁(bi)细胞(bao)，350×g离(li)心5min收(shou)集细胞(bao)，用含5％血(xue)清的无血(xue)清培养基重悬，使细胞(bao)密度达

到3.0×105cells/ml。

3. 培养细胞(bao)至达到(dao)最大密度；

4. 重复2 - 3步骤，依次在无(wu)血(xue)清(qing)培(pei)养(yang)基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血(xue)清(qing)，进行细胞培(pei)养(yang)；如(ru)果细胞的(de)存活率低于80％，那么(me)需(xu)要恢复至前一个血清的(de)含量(liang)，或者采用(yong)更加细化的(de)递减(jian)含量(liang)。

5. 无血清培养基培养细胞。

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